ips培養(yǎng)基使用時(shí)的注意事項(xiàng)
更新時(shí)間：2023-06-27
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ips培養(yǎng)基是一種用于誘導(dǎo)人類(lèi)多能干細(xì)胞（inducedpluripotentstemcells，簡(jiǎn)稱(chēng)iPSCs）分化的培養(yǎng)基。iPSCs是從成人人體組織中重新編程而來(lái)的多能干細(xì)胞，具有與胚胎干細(xì)胞相同的多向分化能力，可以分化成各種不同類(lèi)型的細(xì)胞。這些細(xì)胞可用于研究許多疾病和藥物的開(kāi)發(fā)，并為治療某些疾病提供幫助。
ips培養(yǎng)基的配方主要包括以下成分：
1.DMEM/F12培養(yǎng)基
DMEM/F12是一種無(wú)血清、無(wú)動(dòng)物成分的培養(yǎng)基，其中包含必需氨基酸、糖類(lèi)、維生素和鈉。該培養(yǎng)基的pH值為7.4，適合于支持iPSCs的生長(zhǎng)和增殖。
2.FBS（胎牛血清）
FBS是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)基添加劑，可提供細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子。在培養(yǎng)基中，F(xiàn)BS的濃度通常為15%。
3.靶向因子
靶向因子是一種刺激iPSCs自然分化的化學(xué)物質(zhì)。常見(jiàn)的靶向因子包括BMP、ActivinA和bFGF等。這些因子的添加可以促進(jìn)iPSCs向特定細(xì)胞類(lèi)型分化，并影響iPSCs生長(zhǎng)和增殖。
4.抗生素
抗生素是一種用于防止細(xì)菌污染的藥物。在培養(yǎng)基中，通常添加青霉素和鏈霉素等廣譜抗生素，以確保iPSCs在無(wú)菌條件下生長(zhǎng)和繁殖。
5.防止細(xì)胞黏附的滑液
由于iPSCs需要生長(zhǎng)在支持層上，因此必須添加一種防止細(xì)胞黏附的劑，以防止iPSCs附著在表面上。典型的滑液包括聚乙二醇（polyethyleneglycol）和Matrigel等。
在使用ips培養(yǎng)基進(jìn)行iPSCs培養(yǎng)時(shí)，需要注意以下幾點(diǎn)：
1.培養(yǎng)基應(yīng)在無(wú)菌條件下制備，以避免細(xì)菌和病毒的污染。
2.每天應(yīng)更換新鮮的培養(yǎng)基，以確保iPSCs得到足夠的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子。
3.需要定期檢查iPSCs培養(yǎng)基中是否存在細(xì)菌或霉菌等污染物。
4.培養(yǎng)溫度應(yīng)為37℃，CO2濃度應(yīng)維持在5%左右。
