IPSC培養(yǎng)基(誘導(dǎo)多能干細(xì)胞培養(yǎng)基)是用于誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSCs)生長(zhǎng)和擴(kuò)增的特殊培養(yǎng)基。iPSCs是通過(guò)重編程技術(shù)將成體細(xì)胞(如皮膚細(xì)胞或血液細(xì)胞)轉(zhuǎn)化為多能狀態(tài),這種狀態(tài)下的細(xì)胞具有分化為多種細(xì)胞類型的能力。

IPSC培養(yǎng)基的構(gòu)成:
1.基本培養(yǎng)基
基本培養(yǎng)基通常是標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞培養(yǎng)基,如Dulbecco'sModifiedEagleMedium(DMEM)或KnockOutDMEM/F-12。這些培養(yǎng)基含有細(xì)胞生長(zhǎng)所需的基本成分,包括氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)鹽等。
2.血清
盡管一些無(wú)血清培養(yǎng)基已經(jīng)被開(kāi)發(fā)出來(lái),但傳統(tǒng)的培養(yǎng)基通常使用胎牛血清(FBS)作為添加劑,提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的生長(zhǎng)因子、激素等。血清的質(zhì)量和來(lái)源對(duì)培養(yǎng)基的性能至關(guān)重要。
3.生長(zhǎng)因子
iPSCs的生長(zhǎng)需要特定的生長(zhǎng)因子,這些因子能夠促進(jìn)細(xì)胞的自我更新并防止分化。常用的生長(zhǎng)因子包括:
-bFGF(基礎(chǔ)成纖維生長(zhǎng)因子):促進(jìn)iPSCs的自我更新,避免其分化。
-LIF(白血病抑制因子):在某些情況下,LIF與bFGF一起使用,特別是在小鼠iPSCs培養(yǎng)中,用于維持其多能性。
-GSK-3β抑制劑:GSK-3β抑制劑如CHIR99021可以促進(jìn)自我更新。
-TGF-β信號(hào)通路抑制劑:這種抑制劑通常用于抑制干細(xì)胞的分化。
4.小分子化合物
近年來(lái),科學(xué)家發(fā)現(xiàn)一些小分子化合物能夠通過(guò)靶向信號(hào)通路調(diào)控iPSCs的生長(zhǎng)。例如,抑制Wnt信號(hào)通路的化合物可以幫助維持iPSCs的多能性,而通過(guò)激活某些通路可以增強(qiáng)細(xì)胞的增殖能力。
5.抗生素和抗真菌劑
為了防止細(xì)菌、真菌污染,培養(yǎng)基中通常會(huì)添加抗生素(如青霉素、鏈霉素)和抗真菌劑(如兩性霉素B)。
IPSC培養(yǎng)基的常見(jiàn)類型有:
1.初代
這種培養(yǎng)基通常用于最初誘導(dǎo)iPSCs的建立,包括使用特定的重編程因子(如Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc)對(duì)成體細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染。初代培養(yǎng)基的組成通常比較基礎(chǔ),除了基本的營(yíng)養(yǎng)成分,還會(huì)加入一些增殖因子以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。
2.維護(hù)型培養(yǎng)基
當(dāng)iPSCs已經(jīng)成功誘導(dǎo)出來(lái)并進(jìn)入擴(kuò)增階段時(shí),維護(hù)型培養(yǎng)基就顯得尤為重要。它能夠維持細(xì)胞的多能性,避免分化。典型的維護(hù)型培養(yǎng)基含有bFGF、LIF以及其他必要的生長(zhǎng)因子,能夠在長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保證iPSCs的穩(wěn)定生長(zhǎng)。
3.無(wú)血清培養(yǎng)基
隨著對(duì)iPSC技術(shù)的研究不斷發(fā)展,出現(xiàn)了一些無(wú)血清的培養(yǎng)基。這些培養(yǎng)基去除了血清帶來(lái)的不確定性,使用替代成分(如重組生長(zhǎng)因子或化學(xué)合成小分子)以維持細(xì)胞的增殖和多能性。這些培養(yǎng)基在臨床應(yīng)用中尤其具有優(yōu)勢(shì),因?yàn)樗鼈儽苊饬搜宓呐尾町惡蜐撛诘拿庖叻磻?yīng)。