iPSC培養(yǎng)基在干細(xì)胞研究和相關(guān)領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用,以下是一些具體案例:
iPSC的維持和擴(kuò)增:Gibco™Essential8™培養(yǎng)基是一種無(wú)滋養(yǎng)層、無(wú)外源成分的培養(yǎng)基,只包含多能性干細(xì)胞生長(zhǎng)和擴(kuò)增所必需的八種基本組分。有證據(jù)表明,利用該培養(yǎng)基可維持多種誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞系的多能性,支持50代以上的iPSC培養(yǎng),且細(xì)胞無(wú)任何核型異常征象,并可維持iPSC向所有三個(gè)胚系譜系分化的能力。
擬胚體形成和分化:Gibco™Essential6™培養(yǎng)基與Essential8培養(yǎng)基結(jié)合使用時(shí),可支持穩(wěn)定的擬胚體形成。它不包含F(xiàn)GF2,因?yàn)镕GF2會(huì)抑制擬胚體形成和分化,同時(shí)它提供了一種靈活的形式,可以根據(jù)特定應(yīng)用調(diào)整轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGFβ)和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF2)的水平,以實(shí)現(xiàn)更高效的擬胚體分化。
應(yīng)對(duì)高壓力事件:在進(jìn)行單細(xì)胞傳代等高壓力操作時(shí),可使用Essential8培養(yǎng)基與RevitaCell添加劑組合。RevitaCell添加劑通過(guò)更特異性的ROCK抑制劑,能在高難度應(yīng)用中支持細(xì)胞,使應(yīng)激影響最小化,并且與其他ROCK抑制劑不同,它對(duì)下游細(xì)胞應(yīng)用沒(méi)有致癮性。
從滋養(yǎng)層到無(wú)滋養(yǎng)層培養(yǎng)的過(guò)渡:Essential8適應(yīng)試劑盒可幫助細(xì)胞從滋養(yǎng)層依賴培養(yǎng)體系適應(yīng)轉(zhuǎn)換至無(wú)滋養(yǎng)層培養(yǎng)體系,同時(shí)維持最大的細(xì)胞活力,能在最大限度減少分化的情況下擴(kuò)增細(xì)胞,還可以以單細(xì)胞形式傳代干細(xì)胞系,且對(duì)遺傳穩(wěn)定性沒(méi)有影響。
實(shí)現(xiàn)周末免飼養(yǎng)培養(yǎng):使用包含Qkine熱穩(wěn)定FGF2-G3和TGF-β1PLUS生長(zhǎng)因子的E8樣培養(yǎng)基,可在不需要每日更換培養(yǎng)基的情況下對(duì)iPSCs進(jìn)行維持、擴(kuò)增和多能性評(píng)估,實(shí)現(xiàn)了無(wú)需周末維護(hù)的培養(yǎng)和擴(kuò)增,同時(shí)保持了細(xì)胞的多能性和增殖潛力。在該培養(yǎng)基中培養(yǎng)了一個(gè)月的iPSC,始終表現(xiàn)出高密度而沒(méi)有自發(fā)分化,且通過(guò)高水平表達(dá)多能性標(biāo)志物NANOG、SOX2和OCT-4,保持了它們的多能潛力。