
簡要描述:胰高血糖素樣肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)是胰高血糖素前驅(qū)體的一部分。胰高血糖素前驅(qū)體于胰臟、小腸下部以及下丘腦中表達。
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LBIS® GLP-1(active) ELISA KIT![]()
LBIS® 胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)(活性) ELISA 試劑盒

胰高血糖素樣肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)是胰高血糖素前驅(qū)體的一部分。胰高血糖素前驅(qū)體于胰臟、小腸下部以及下丘腦中表達。該前驅(qū)體的構(gòu)造中含有與糖代謝有關(guān)的各種各樣的生理活性物質(zhì)(胰高血糖素,腸高血糖素,胃泌酸調(diào)節(jié)素,GLP-1,GLP-2)的氨基酸序列。根據(jù)表達部位加工酶的特異性,胰臟主要分泌胰高血糖素,而小腸下部主要分泌腸高血糖素和胃泌酸調(diào)節(jié)素。GLP-1 和 GLP-2 則存在于胰高血糖素前驅(qū)體后半的結(jié)構(gòu)中。GLP-1由37個氨基酸組成,有2種生物活性形式,分別為 GLP-1(7-37)和GLP-1(7-36)酰胺。兩者都存在于小腸下部、胰臟和下丘腦中,GLP-1(7-36)酰胺在下丘腦中占免疫反應(yīng) GLP-1(IR-GLP-1)總量的 55-94%,在小腸中占 27-73%。但在胰臟中只有極少量存在。大部分哺乳類(如人類、大鼠、小鼠、牛、豬、狗等)的 GLP-1 結(jié)構(gòu)相似。
GLP-1: hdeferhaegtftsdvssylegqaakefiawlvkgrg
GLP 1(7-37): haegtftsdvssylegqaakefiawlvkgrg
GLP 1(7-36) amide: haegtftsdvssylegqaakefiawlvkgr-NH2
GLP-1 與小腸上部分泌的 GIP 統(tǒng)稱為腸促胰素。該類激素是葡萄糖濃度依賴性方式促進胰島素分泌。同時具有抑制胃腸道蠕動和胃液分泌、抑制胰高血糖素的釋放、促進生zhang抑素的分泌、使食欲減退,促進腸上皮細胞生長、以及外周組織促進非胰島素依賴性的葡萄糖的消耗,并促進細胞的生長的作用。有報告指出該類激素與垂體激素的分泌也有關(guān)系。
GLP-1(7-36)酰胺在生物體內(nèi)代謝迅速,DPP-IV(dipeptidyl peptidase IV)會使其失去N-末端的兩個氨基酸變?yōu)?GLP-1(9-36)酰胺,GLP-1(7-37)變?yōu)?GLP-1(9-37)后會失去活性。有報告指出,體外實驗中,在犬的血漿中 GLP-1(7-36)酰胺的半衰期是為 61±9 分,GLP-1(7-37)為 132±16 分。因此 GLP-1 的測定,取樣的時候有必要使用 DPP-IV 抑制劑。
此外,腸促胰素中的 GIP 則是有力促進 GLP-1 分泌的激素。回腸中 GLP-1 的分泌不是食物直接刺激腸道而產(chǎn)生的,而是由于dan堿能和肽類的刺激所產(chǎn)生的。
◆特點
● 短時間測定(完quan反應(yīng)時間:5小時)
● 微量樣品(標(biāo)準(zhǔn)操作用量:10 μL)可測
● 使用對環(huán)境無害的防腐劑
● 全部試劑均為液體,可直接使用
● 精密的測定精度和高再現(xiàn)性
◆構(gòu)成
組成 | 狀態(tài) | 容量 |
(A) 抗體固相化 96 孔板 | 洗凈后使用 | 96 wells(8×12)/1 塊 |
(B) GLP-1標(biāo)準(zhǔn)溶液(500 pg/mL) | 稀釋后使用 | 200 μL/1 瓶 |
(C) 緩沖液 | 即用 | 60 mL/1 瓶 |
(D)生物su結(jié)合抗GLP-1抗體 | 稀釋后使用 | 100 μL/1 瓶 |
(E) 過氧化物?抗生物su蛋白結(jié)合物 | 稀釋后使用 | 100 μL/1 瓶 |
(F) 顯色液(TMB) | 即用 | 12 mL/1 瓶 |
(H) 反應(yīng)終止液(1M H2SO4)※小心輕放 | 即用 | 12 mL/1 瓶 |
( I ) 濃縮洗凈液(10×) | 稀釋后使用 | 100 mL/1 瓶 |
封板膜 | 4 張 | |
使用說明書 | 1 份 |
◆交叉反應(yīng)
※交差率是 1,000 pg/mL 濃度時的數(shù)據(jù)
動物類型 | 對象物質(zhì) | 反應(yīng)性和反應(yīng)率(%) |
Mouse/Rat | GLP-1(7-36)amide | 100 |
GLP-1(7-37) | < 0.1 | |
GLP-1(1-37) | ― | |
GLP-1(9-36)amide | ― | |
GLP-2 | ― | |
Glucagon(1-29) | ― | |
Insulin | ― | |
Secretin | ― | |
GIP | ― | |
VIP | ― | |
GRF | ― | |
Bovine | Glucagon(1-29) | ― |
VIP | ― | |
Porcine | Glucagon(1-29) | ― |
VIP | ― |
―:不存在交叉反應(yīng)
◆樣品信息
小鼠和大鼠的血清及血漿
10 μL/well(標(biāo)準(zhǔn)操作方法)
※測量中由于酶(DPP-IV 等)的影響,采血時請注意防止 GLP-1(7-36)酰胺的分解,再使用。
◆測定范圍
1.56~50.0 pg/mL 【0.47~15.16 pmol/L(分子量3298)】(標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍)
7.8~250 pg/mL(樣品量 10 μL)
3.9~125 pg/mL(樣品量 20 μL)
◆Validation data
精度測試(組內(nèi)變異)
樣品 | A | B |
1 | 23.7 | 6.44 |
2 | 23.2 | 5.97 |
3 | 23.4 | 6.39 |
4 | 24.0 | 5.87 |
5 | 24.1 | 6.44 |
mean | 23.7 | 6.22 |
SD | 0.35 | 0.28 |
CV(%) | 1.5 | 4.5 |
單位:pg/mL
重復(fù)性測試(組間變異)
測量日/樣品 | E | F |
第0天 | 25.1 | 6.31 |
第1天 | 25.1 | 6.16 |
第2天 | 25.0 | 6.24 |
第3天 | 25.0 | 6.37 |
mean | 25.0 | 6.27 |
SD | 0.03 | 0.09 |
CV(%) | 0.13 | 1.4 |
單位:pg/mL n=4
加標(biāo)回收測試
樣品C
添加量 | 實測值 | 回收量 | 回收率(%) |
0.00 | 3.93 | – | – |
3.26 | 7.28 | 3.35 | 103 |
6.51 | 10.3 | 6.37 | 97.8 |
8.14 | 12.1 | 8.17 | 100 |
樣品D
添加量 | 實測值 | 回收量 | 回收率(%) |
0.00 | 11.8 | – | – |
7.16 | 19.1 | 7.30 | 102 |
14.3 | 25.5 | 13.7 | 95.8 |
21.5 | 32.4 | 20.6 | 95.8 |
稀釋直線性測試
用稀釋緩沖液分三次連續(xù)稀釋2個血清樣品的結(jié)果,直線回歸方程的R2在0.997~0.9999之間。
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級 | 備注 |
| 637-15129 | (AKMGP-011) LBIS® GLP-1(Active) ELISA Kit LBIS® 胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)(活性) ELISA試劑盒 | 96 tests | - | - |